Análisis de ADN: Técnicas Tradicionales

Muchos laboratorios tienen la capacidad de realizar pruebas de ADN nuclear, que es la copia de ADN que existe en el núcleo de cada célula. Pero solo unos pocos laboratorios ofrecen técnicas más especializadas, como el cromosoma Y o el análisis de ADN mitocondrial. Veamos algunas de estas técnicas con mayor detalle.

El análisis de polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción ( RFLP ) fue uno de los primeros métodos forenses utilizados para analizar el ADN. Analiza la longitud de las hebras de ADN que incluyen pares de bases repetidos. Estas repeticiones se conocen como repeticiones en tándem de número variable ( VNTR ) porque pueden repetirse entre una y 30 veces.

El análisis RFLP requiere que los investigadores disuelvan el ADN en una enzima que rompe la hebra en puntos específicos. El número de repeticiones afecta la longitud de cada hebra de ADN resultante. Los investigadores comparan las muestras comparando las longitudes de las hebras. El análisis RFLP requiere una muestra bastante grande de ADN que no haya sido contaminada con suciedad.

Muchos laboratorios están reemplazando el análisis RFLP con análisis de repetición corta en tándem ( STR ) . Este método ofrece varias ventajas, pero una de las más importantes es que puede comenzar con una muestra de ADN mucho más pequeña. Los científicos amplifican esta pequeña muestra a través de un proceso conocido como reacción en cadena de la polimerasa o PCR . La PCR hace copias del ADN al igual que el ADN se copia a sí mismo en una célula, produciendo casi cualquier cantidad deseada de material genético.

Una vez que se ha amplificado el ADN en cuestión, el análisis STR examina la frecuencia con la que se repiten los pares de bases en loci o ubicaciones específicas en una hebra de ADN. Estos pueden ser repeticiones de dinucleótidos, trinucleótidos, tetranucleótidos o pentanucleótidos, es decir, repeticiones de dos, tres, cuatro o cinco pares de bases. Los investigadores a menudo buscan repeticiones de tetranucleótidos o pentanucleótidos en muestras que se han sometido a amplificación por PCR porque es más probable que sean precisas.